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总RNA的提. Trizol 法提取 )

发布者:买球网科技    发布时间:2021-06-08     
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于收集到生物材料之后好的能即刻进行 RNA 制备工作.若需暂时储存则应以液氮将生物材料急速冷冻后储存于-80℃冷冻柜.于制备 RNA 时将储存于冷冻柜的材料取出立即以加入液氮研磨的方式打破细胞不可以先行解冻 以避免 RNase 的作用.


1.提取组织 RNA 时每50~100mg 组织用 1ml Trizol 试剂对组织进行裂解;提取细胞 RNA 时先离心沉淀细胞每 5-10 ╳106 个细胞加 1ml Trizol 后反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞;


       2.将上述组织或细胞的Trizol 裂解液转入EP管中,于室温15~30C下放置 5 分钟 ;


3. 于上述 EP 管中按照每 1ml TRIZOL 加 0.2ml 氯仿的量加入氯仿盖上 EP管盖子于手中用力震荡 15 秒于室温下(15℃~30℃)放置 2~3 分钟后
12000g(2℃~8℃)离心 15 分钟;


4. 取上层水相置于新 EP管中,按照每 1ml TRIZOL加 0.5ml 异丙醇的量加入异丙醇于室温下(15℃~30℃)放置 10 分钟,12000g(2℃~8℃)离心 10 分钟 ;


5.弃上清 按照每 1ml TRIZOL 加 1ml 75%乙醇进 行洗涤涡 旋混合7500g(2℃~8℃)离心 5 分钟弃上清;


6. 让沉淀的 RNA 于室温下自然干燥;


7.用 Rnase-free water 溶解 RNA 沉淀.



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文/新华社供图/视觉中国。鄙人的身世也是绝对清白的。据我了解,快递小哥、外卖小哥,还有网约车司机,他们的收入还是不错的,所以他们才愿意去这样努力拼搏。
买球网英文解释:After finishing middle school and high school studies in the city, Cho's elder son was admitted to Peking University for undergraduate studies, and then returned to Hefei later for his MBA at the University of Science and Technology of ChinaThat was certainly not the policy under Obama when he launched the US pivot-to-Asia policy, trying to gang up US allies on ChinaThe confederation aims to build a bridge between China and Benin, with the help of the Belt and Road Initiative
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