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常见问题
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  • 试剂盒-标准曲线不1样?

    · ELISA比色法实验显色是1个酶催化的实验.于1定范围内环境温度越高酶活性越强相同孵育时间内温度高的检测数据高.相同温度孵育时间长的检测数据高.

    · 说明书的标曲只是1个参考用途展示大概的结果形式.不能直接使用否则试剂盒就没有必要提供标准品了客户直接用说明书的曲线来计算了对吧.[每次实验当时都需要做标准曲线才是最准确的方法]

    · 标准曲线是否良好? 客户可以绘制相应的拟合曲线(线性或者曲线形式)R2大于0.9以上是可以接受的0.99那就是非:眯∈点后面9越多越好.


  • 试剂盒做多少个样品? [举例:KET6013]

    * 试剂盒规格的48或者96通常代表的是反应次数或者孔的数量.而不是样品数量.(标准品对照都会参与到反应或者加入到孔中因此样品数量肯定会少)


    试剂盒做1次实验需要客户做:6个标准品(标准品数量根据各个说明书里面说的来设置6个浓度点)+ 1个空白孔(标准含量为0) = 7.通常每个实验都要做复孔(最少2个复孔也有做3个复孔的.2个复孔意味着1个东西需要加到2个孔统计学需求算平均值等)这么1来被占用的孔就是7*2=14个孔.96-14=82个孔只有这82个孔可以给客户拿去测试他的样品.如果也算是复孔那么就是82/2=41个样品.这是最多可以测试多少样品.

    image.png

    总结:

    [2个复孔]样品数量= [ 96 - (标准品数量+对照组数量)*2] / 2

    [3个复孔]样品数量= [ 96 - (标准品数量+对照组数量)*3] / 3


    #强调#:标准品的数量阳性对照阴性对照 的设置根据说明书来有些试剂盒是没有阳性对照的.


    以上为1次性将试剂盒用完的样品数量.如果客户要做2次实验需要绘制2次标曲.对应的继续相减.



  • 特殊检测类型:生物发光法bio-luminescence

    1. 主要涉及ATP类的试剂盒消耗能量ATP发光(萤火虫).

    2. 主要的实验:荧光素酶分析实验.

    image.png

    使用仪器:

    1. 化学发光仪

    2. 光度计(Luminometer)

    3. 多功能酶标仪(含化学发光生物发光检测模块).


  • ELISA实验数据不稳定背景高:洗涤很关键

    1.试剂盒使用前通常需要于室温下平衡30-60min.(温度对酶催化反应有影响).

    2.洗板时需保证微孔板平放将洗涤液注满各孔但尽量避免漏液溢液以每孔300 l为宜;板洗次数1般为3次要保证洗板的浸泡时间每次浸泡时间1般为30-60 秒;尽量减少洗液残留量推荐每次洗板后进行拍板并及时更换吸水纸避免吸水纸的碎屑粘到反应孔内.


  • 用什么96孔板?

    image.png

  • 96孔板:Solid plate & Strip(条) plate

    image.png

  • 比色法 & 荧光法:哪个更好?


    比色法:特定波长光穿透样品光被吸收的情况.(酶标仪)(分光光度计)

    荧光法:特定波长光激发染料发出其它波长光的情况.(荧光/多功能酶标仪)

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